非变性PAGE结合串联质谱研究人胰腺癌细胞胞内蛋白复合物
  • 【摘要】

    本文拟建立一种基于凝胶的蛋白质组学方法来研究人胰腺癌细胞胞内蛋白复合物.以自行培养的人胰腺癌细胞系SW1990为材料,经温和裂解后,通过低温差速离心对细胞全裂解液进行粗分获得大分子量(蛋白复合物)组分,采用非变性丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)方法对蛋白复合物进行分离和制备,经胶内酶切后进行基质辅助激光解析-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF Ms)分析,用GPS Explorer软件... 展开>>本文拟建立一种基于凝胶的蛋白质组学方法来研究人胰腺癌细胞胞内蛋白复合物.以自行培养的人胰腺癌细胞系SW1990为材料,经温和裂解后,通过低温差速离心对细胞全裂解液进行粗分获得大分子量(蛋白复合物)组分,采用非变性丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)方法对蛋白复合物进行分离和制备,经胶内酶切后进行基质辅助激光解析-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF Ms)分析,用GPS Explorer软件搜索Swiss-Prot蛋白数据库.Native PAGE上2个清晰条带经MALDI-TOF/TOF MS分析,鉴定为2个大蛋白复合物:20S蛋白酶体(720kDa)和Hsp90二聚体(180kDa).这些蛋白复合物参与并调控细胞的增殖、分化、凋亡和免疫等.Native PAGE结合串联质谱法是研究蛋白复合物的一种简便、快捷和有效的方法,可用于研究人细胞蛋白复合物. 收起<<

  • 【作者】

    王新立  陈国强  赵志云  李智立 

  • 【作者单位】

    中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础学院,北京

  • 【会议名称】

    中国物理学会质谱分会第八届全国会员代表大会暨第九届全国学术交流会

  • 【会议时间】

    2008-12-11

  • 【会议地点】

    海口

  • 【主办单位】

    中国物理学会

  • 【语种】

    chi

  • 【关键词】

    人胰腺癌  癌细胞  胞内蛋白复合物  蛋白质组学  串联质谱法