猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
  • 【摘要】

    在猪瘟兔化弱毒株较保守的EO基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法.结果表明:本方法检测的最低拷贝数为3.84持贝/μL,线性范围是107-100;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻(BVDV)作为模板进行扩增,未出现阳性信号;试验组内变异系数1.05%-1.84%,组间变... 展开>>在猪瘟兔化弱毒株较保守的EO基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法.结果表明:本方法检测的最低拷贝数为3.84持贝/μL,线性范围是107-100;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻(BVDV)作为模板进行扩增,未出现阳性信号;试验组内变异系数1.05%-1.84%,组间变异系数为3.70%-5.43%,对32批猪瘟兔化弱毒细胞培养抗原样品进行定量检测,同时用兔定型热反应法测定兔体感染量(rabbit infection dose,RID)进行比较,两者有较好的相关性.本方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好的优点,初步应用表明对猪瘟疫苗生产配制及成品检验具有指导作用. 收起<<

  • 【作者】

    刘大伟  张小飞  胡来根  薛家宾  尹秀凤  毛火云 

  • 【作者单位】

    南京天邦生物科技有限公司,江苏南京,211102

  • 【会议名称】

    中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

  • 【会议时间】

    2009-09-01

  • 【会议地点】

    南宁

  • 【主办单位】

    中国畜牧兽医学会

  • 【语种】

    chi

  • 【关键词】

    猪瘟兔化弱毒疫苗  荧光定量PCR  定量检测  相关性分析