双重荧光PCR检测HIV前病毒DNA及其在婴幼儿HIV感染早期诊断中的应用
  • 【摘要】

    目的建立双重荧光PCR检测HIV前病毒DNA的方法,并应用于婴幼儿HIV感染的早期诊断。方法采用TaqMan技术,组建针对人类核糖核酸酶P( RNase P)和HIV的长末端重复序列( LTR)基因的双重荧光PCR体系;采用TA克隆技术构建pTG19-T重组质粒作为模板进行该方法灵敏度的评价;采用11例已知健康人的血样和98例已知HIV感染者血样进行该方法的特异性验证;收集2011年1月至2012... 展开>>目的建立双重荧光PCR检测HIV前病毒DNA的方法,并应用于婴幼儿HIV感染的早期诊断。方法采用TaqMan技术,组建针对人类核糖核酸酶P( RNase P)和HIV的长末端重复序列( LTR)基因的双重荧光PCR体系;采用TA克隆技术构建pTG19-T重组质粒作为模板进行该方法灵敏度的评价;采用11例已知健康人的血样和98例已知HIV感染者血样进行该方法的特异性验证;收集2011年1月至2012年9月浙江省各地妇幼保健医疗机构上送的96份婴幼儿样本,用新方法进行HIV的早期诊断,并将检测结果与罗氏HIV DNA定性检测试剂盒作比较。结果双重荧光PCR新方法能特异性检测HIV前病毒DNA,特异性为100%,检测灵敏度为100拷贝/反应;新方法和罗氏HIV DNA定性检测试剂盒检测96份婴幼儿样本,结果完全一致(符合率为100%)。结论建立的双重荧光PCR方法经济便捷、特异性好、灵敏度高、结果准确、易于推广,有望用于婴幼儿HIV早期诊断,并为HIV前病毒DNA的检测提供了一个通用技术平台。 收起<<

  • 【作者】

    张佳峰  郭志宏  黄晶晶  丁晓贝  黄蓓 

  • 【作者单位】

    浙江省疾病预防控制中心艾防所

  • 【刊期】

    中华微生物学和免疫学杂志 ISTIC PKU 2013年8期

  • 【关键词】

    荧光PCR  人类免疫缺陷病毒  婴幼儿  早期诊断  Fluorescence PCR  Human immunodeficiency virus ( HIV)  Infant  Early diagnosis 

  • 【基金项目】

    浙江省医药卫生科技计划(2009B035)